多功能单细胞显微操作系统FluidFM BOT产品手册

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Chinese version of the brochure "FluidFM BOT for injection into adherent cells" (version 2.0)

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8.

1. Flui dFM ® BOT 多 功能 单细 胞显 微操 作系 统

2. 2 Subject to change without notice. Revision: 1.3 Copyright © 2016 Cytosurge AG, Switzerland Fl uidFM ® 单 细 胞 研究 新突 破!

4. 蛋白 抗体 , 重组染色体 ... fL体积注射精度 . 注 射 体 积 精 确 可 控 FluidFM 微型纳米注射器内含荧光染料,可用来 作为参照,计算注射入细胞内物质的体积。 FluidFM纳米注射器 的内部有 恒定 的 量程 ,可以 用起计算注入到细胞内物质的总体积。注射后, 将每个细胞的荧光强度与FluidFM纳米注射器的 荧光强度进行比较,并且利用该信息,可以计算 简单 自带换算软件 每个细胞的注射体积。 使用系统内自带的ImageJ软件可以对其体积快速 的进行计算。而这种体积的确定对于许多实验, 例如确定剂量-反应关系时至关重要。 Subject to change without notice. Version: 2.0, p. 4 Copyright © 2018 Cytosurge AG, Switzerland 精准注入细胞 . 快速轻柔的将小分子(Lucifer Yellow dye) 注射入细胞(CHO)。 Fl uid FM 微型纳米注射器。 可作为参照来计算注入胞内不同物质的体积。 适用于任何可溶性小分子化合物 Flui d FM ® – 精准纳米注射 FluidFM BOT 多功能单细胞显微操作系统是将多 种不同类型的物质精准注入细胞的最佳选择。 这些物质可以是蛋白质、RNA、质粒或者其他的 物质。 FluidFM BOT 的注射效率极高,适用于多种细胞类型, 如 H eLa, HEK, CHO , hiPS 等等。 部 分 发表文献: O. Guillaume-Gentil, E. Potthoff, D. Ossola, et al. Force- controlled fluidic injection into single cell nuclei. (2013) Small, 9(11), 1904 — 1907. doi:10.1002/smll.201202276 A. Meister, M. Gabi, P. Behr, et al. FluidFM: Combining atomic force microscopy and nanofluidics in a universal liquid delivery system for single cell applications and beyond. (2009) Nano Letters, 9(6), 2501-2507. doi:10.1021/nl901384x 荧 光标记的小分子化合物 LUCIFER YELLOW, AL EXA FLUOR ® , ... 核酸 R NA, DNA , ... 精确 fL级别注射精度 可信 操作精度高

5. 精准 直接 注入细胞核内 Flu i dFM ® CRISPR-Cas 方案优化 适 用于 CRISPR-Cas 复合物,可快速精准的将其注射 到 极难转染的目的细胞中。 借助 FluidFM BOT 可以轻松将 CRISPR-Cas 复合物 注入目的细胞,同时还可以选择注入细胞核或者细 胞质。这种操作不会对其他的细胞产生影响。 如右图中的 HeL a细胞,只需2秒即可完成核内转染 (液压 75 mbar ,体积 130 fL)。 精 确 可直接注入细胞核 快速 2 秒钟即可完成 优化 可 注入极难转染的细胞 无损 对细胞无毒性 实用 >80% 的转染效率 CRISPR-C as 9 微量注射。 荧光标记的 C RISPR-Cas 9 复 合 物 精 准 注入细胞核(Hela) 。 极难转染细胞的最佳解决方案 Flui d FM ® 增加质粒的转染效率 与传统方法相比,FluidFM BOT 可以将 外源性 质粒快速的注射到细胞当中,对细胞没有任何损 伤,尤其适用于极难转染的细胞。 借 助 FluidFM BOT 可轻松实现每小时注射数百个 细 胞 , 转染效率可达80%以上。 与 传 统 转染手段相比,FluidFM BOT 不会引入除 目 的 质 粒之外的物质,最大程度的减少了对细胞 的 毒 性 作用。且表达时间也会更短,右图显示注 射 后 3个小时,即可检测到目的蛋白的表达。 Subject to change without notice. Version: 2.0, p. 5 Copyright © 2018 Cytosurge AG, Switzerland 高效 注射3小时后,即可检测到表达 PLASMID 微量注射。 注射后3小时,CHO细胞 pmCherry- TRIM21 和 pEGFP-UHRF1 的蛋白表达 。

6. 通过软件控制可以自动进行FluidFM微型纳米注射 器切换、清洗及样品更换。所有的实验都过程准确 无菌,将污染风险和人为误差降到最低,极大的提 高了工作效率。 Subject to change without notice. Version: 2.0, p. 6 Copyright © 2018 Cytosurge AG, Switzerland 极其简单易用 所 有 操 作自动 化 控 制 选择目的细胞只需轻点鼠标!借 助 FluidFM BOT 专用操作软件-- ARYA ,可以获得高分辨 的细胞图像,仅需点击鼠标即可完成对目的细胞 的胞质和胞核定位注射。 前期准备 简单 ,操作自动化,软件界面直观 友 好 , 任何用户每小时 都可 注射100多个细胞。例 如,对于将 黄色 荧光染料注射到HeLa细胞 的实 验 , 平均速度可 达每小时100-300个细胞 。 非 侵入性和可追溯 最新技术突破 传 统的注射手段具有明显的局限性,比如容易损伤 细 胞,费时费力等等,但是FluidFM技术的出现, 解 决了这一系列的问题! 借助FluidF M BOT ,科学家可以对任何贴壁细胞进 行原位注射,如iPS 细胞等。因为FluidFM的微型 纳米注射器的尖端孔径 小, 只有800纳米,注射 器的压力与体积可以通过软件精确控制。 普通 玻璃微型注射器的横截面积大约有1μm 2 ,而 优化后的FluidFM微型纳米注射器的横截面积仅 为其1/5000。结合其流畅可控的移动,FluidFM BOT 可以达到轻松穿透胞膜和核膜且对细胞基本 无损伤的效果。实验数据表明,细胞存活率可达 95%以上。因此不同的物质可以相互组合分别注 入同一细胞。而且FluidFM BOT 还配置专用的温 控培养箱,适用于长时间细胞培养和视频成像。 微ଞ 适用于绝大多数贴壁细胞 ݿࣾ 15 分钟实验前准备 ܤݸ >95% 细胞活性 ݝள 自动化程度高 ࣻ੏ 点击鼠标即可完成操作 简单 配套专用软件 FluidFM BOT 省时省力。实验前仅需15分钟 准备即可,仪器的校准调制仅需1uL的样品。 Fl ui d FM A RYA 操作软件。 点击鼠标即可完成实验。 微型纳米注射,细胞无损。 HeLa细胞中注入CRISPR-Cas9 RNP复合物,不同时间点观测。 30 minutes (A), 1 hour (B), 2 hours (C) and 8 hours (D) 。 A B C D

3. FluidFM %27 多功能单细胞显微操作系统配置独 有的FluidFM微型 纳米 注射器,可将多种外源性的 物质定量原位的注入细胞内,具有精准、快速、无 损、可控等 特点 。 FluidFM BOT 极大的方便了单细胞水平的研究, 尤其适合应用于精准医疗、单细胞生物学、单细胞 质谱、单细胞基因编辑、药物研发等领域。 单细胞水平精准注射 。 适用于多种细胞。 单细胞研究必备利器 Fl uidFM ® BOT SYSTEM Subject to change without notice. Version: 2.0, p. 3 Copyright © 2018 Cytosurge AG, Switzerland 无损 不影响细胞活性 快速 每小时可注射数百个细胞 可控 fL体积注射 精准 细胞质或细胞核原位操作 Fluid FM 微 型 纳米 注射器。 专利技术FluidFM 微型 纳米注射 器 具有金字塔形尖端和纳米级孔径。 干细胞 肿瘤细胞 极难转染的细胞 为 什 么选择FluidFM BOT ? FluidFM BOT 多功能单细胞显微操作系统在以下方面有着 巨大的优势: ƒ 细胞体积比较小,传统方法难以实现的单细胞注射。 ƒ 在极难转染的细胞内进行基因编辑。 ƒ 精确的定位细胞内注射位置。 应 用 领域: FluidFM BOT 多功能单细胞显微操作系统应用领域包括: ƒ 基因编辑 ƒ 表观遗传修饰 ƒ 药物研发 ƒ 药物毒理学研究 ƒ 干细胞 ƒ 肿瘤细胞 ƒ 细胞系驯化

7. TUBING BUFFER SOLUTION GLASS SLIDE OPTICAL MICROSCOPE MICROCHANNELED FluidF M ® PROBE RESERVOIR PRE-ASSEMBLED FluidF M ® PROBE HOLDER OPTICAL FORCE FEEDBACK 仪器高度整合,简单易用 Fl uidFM ® B OT 由于单细胞研究的精确性,仪器的高度自动化与简 便的操作变得极为重要。 FluidFM BOT 系统将单细胞研究提升到了一个新高 度,这得益于FluidFM BOT 的配置极为严格,包括 了高精度的3D位移台、整合微流体控系统、简洁专 用的自动化操作软件以及机动倒置显微镜。 Subject to change without notice. Version: 2.0, p. 7 Copyright © 2018 Cytosurge AG, Switzerland 易用 软件操作简便快捷 简单 自动化程度高 专利技术 Flui dFM ® 技术 FluidFM技术将微流控技术与原子力技术完美结 合,形成了FluidFM最核心的微型纳米注射器。 可溶性的小分子化合物 或者纳米微颗粒可以通过 微型纳米注射器被注射或吸入。微型纳米注射器 的孔径最小为300nm,压力精度为亚mBar级 别,可通过精确控制正压和负压来决定fL体积的 提取和注射量。 力学敏感型的AFM探针实时反馈针尖与被接触物 体的相互作用力,确保微型纳米注射器可以精确 和温和对细胞、微观物体和微结构表面进行微操 控。 强大 12+ 应用领域 高质 精密加工 独有的 F luid FM ® 技术。 微流控 技术 与原子力 技术 完美结合。 FluidFM BOT 是一个完整的独立系统,它包含了 所有必要的元件,如机动倒置显微镜和防振台, 它配备了定制的压力泵,保证了整个实验的稳 定。还包括一个带有HEPA过滤器和紫外光定制的 培养箱,以减少污染。FluidFM BOT 还配置专用 的探针,包括FluidFM微型纳米注射器。注射器 上的的条形码阅读器提供了探针相关的特征和质 量控制数据。最后,通过ARYA软件可轻松实现所 有的单细胞操作。 F luid FM ® B O T . 一体机外观(可配置温度培养箱) ARYA软件,简单 易用。 软件自动控制 。 完善 S T AND-ALONE SYSTEM 精确 fL体积注射

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